Metode yang dipakai dalam perhitungan phytoplankton yaitu dengan metode perhitungan pribadi (direct counting) memakai Sedgwick Rafter dan Haemocytometer.
Alat dan Bahan
Alat :
- Mikroskop
- Sedgwick Rafter
- Pipet Pasteur
- Gelas ukur/ silinder 10 ml
- Paper lens cleaning
- Minyak emercy
- Objeck glass
- Cover glass/ deck glass
- Counter dan alat tulis
Bahan :
- Lugol’s solution
- Formalin 4 %
- Minyak emercy ( untuk pembesaran 1000 kali )
Pengamatan dan Penghitungan Jumlah Plankton
A. Pengamatan dengan Sedgwick Rafter
1. Pengamatan dilakukan dengan memakai mikroskop, dengan pembesaran 40X atau 100X
2. Penghitungan dilakukan dengan memakai sedgwik rafter dengan cara mengambil 1 ml air sampel dari botol 100 ml, kemudian ditutup dengan gelas penutup
3. Penghitungan dilakukan dengan menghitung jumlah plankton yang terdapat dalam sedgwick rafter.
4. Apabila sampel terlalu padat, dilakukan pengenceran dengan destilled water.
Catatan :
· Apabila sampel pribadi diambil dari kolam, tanpa net plankton maka perhitungan pada sedgwick rafter pribadi jumlah unit / ml.
· Disarankan untuk analisa dahulu sebelum diberi formalin, untuk mengetahui keberadaan dinoflagellata.
Contoh perhitungan phytoplankton dengan sedgwick rafter
· Misal air tersaring dengan net plankton sebanyak 5 liter
· Didapat 100 ml dalam botol penampung
· Dalam pengamatan diambil 1 ml sampel dengan memakai pipet pasteur
· Identifikasi dan hitung jumlah plankton yang terdapat pada semua ruang/ kotak dalam sedgewick rafter.
Misalkan didapat = 60 unit (sel,koloni atau filament)
Total 100 ml = 60 x 100 unit
1
Sehingga dalam 5000 ml (5 liter air kolam) = 60 x 100 cells
jadi kalau dalam 1000 ml (1 liter) = 60 x 100 x 1000 = 120 unit / L
5000
Gb 01. Penampang Sedwick Rafter
Sedgwick rafter terdiri dari :
Panjang : 50 kotak (50 mm)
Lebar : 20 kotak (20 mm)
Tinggi : 1 mm
Volume air yang tertampung dengan atas ditutup slide glass = 1 ml
Contoh perhitungan zooplankton dengan sedwick rafter
Diketahui :
1. Volume penampung net (V1) = 40 ml
2. Kedalaman air = 100 m
3. Jari-jari net plankton = 4.35 cm
4. Volume sedgwick rafter = 1 ml
5. Jumlah zooplankton dalam S-R (N1) = misal 30 ekor
Maka jumlah zooplankton dalam liter air (N2) adalah……….?
Maka :
Jumlah volume air tersaring (V2) = Luas ganjal x Tinggi
= η r2 x 100
= 3,14x 4.35 cm x 4,35 cm x 100cm = 5942 cm3
= 5942 ml
N2 = V1 x N1 = 40 ml x 30 ekor /ml = 0.2184 ekor/ml = 2184 ekor/liter
V2 5492 ml
B. Pengamatan dengan Haemacytometer
Untuk pengamatan dengan sel yang ukurannya lebih dari 8 micron dan tidak terlalu padat untuk dihitung, penghitungan sanggup dilakukan pribadi pada blok A,B,C,D dan akhirnya dibagi 4(empat) = N cell / ml
Gb 02. Penampang Haemacytometer
Haemacytometer terdiri dari beberapa blok dengan sisi :
Panjang = 1 mm
Lebar = 1 mm
Tinggi = 0.1 mm
Volume yang tertampung setiap blok (1 mm2) dengan atas ditutup cover glass
ð 0.1mm x 1mm x 1mm = 0.1 mm3 = 10-4 ml
Gb 03. Blok pada Haemocytometer
Volume air di Blok, misal B = 1 x 1 x 0.1 mm
= 0.1 mm3
= 1 / 10 = 1 x 10-1 mm3
Dalam 1 ml = 1 x 1 x 1 cm3
= 10 x 10 x 10 mm3 = 1000 mm3
Air dalam 1 x 10-1 mm3 ditemukan N cell dalam 103 didapat = N x 104 cell / ml
Untuk ukuran sel yang kecil dan padat perhitungan sanggup dilakukan di blok E (= 25 kotak kecil )
= 5 kotak terdiri dari 1,2,3,4 dan middle
= Y cell dan dirata-rata
Volume air di kotak 1,2,3,4 = 0.2 x 0.2 x 0.1 mm3 = 0.001 mm3
1 kotak = 4 x 10-3 mm3
1 ml = 103 mm3
Dalam air 4 x 10-3 ditemukan = Y / 5 cell
Air 1 ml = (Y / 4 x 10-3 x 5 ) x 103 = Y x 5 x 104 sel / ml